Bevezetés: Az átlagos TCT térfogat (MPV) és az éretlen vérlemezke frakció (IPF) összefüggésbe hozhatók a gyógyszeres kezelés ellenére fennálló reziduális magas
trombcita reaktivitással (HTPR). A HTPR esetek hátterében álló mechanizmusok nem teljesen tisztázottak.
A trombociták (TCT) mozgását vizsgáltuk teljes vérben 1 órás ülepítés során. Az ellentétesen mozgó trombociták morfológiai és funkcionális különbségeire voltunk
kíváncsiak. A csökkent aggregációs készség hátterében álló tényezőket kívántuk feltárni új megközelítésünk segítségével.
Módszerek: Vénás vért vettünk 46 clopidogrelt szedő post-stroke betegtől és 21 egészséges önkéntestől. A teljes vérben és annak egy órás szedimentációját követően képzett alsó és felső frakciókban meghatároztuk a trombocita számot, az MPV, IPF és nagyon éretlen
(H-IPF), valamint 'large cell ratio' (LCR) értékeket.
A trombociták mozgását antiszedimentációs rátával (TAR), funkciójukat pedig impedancia aggregometriával vizsgáltuk. Morfológiai analízishez transzmissziós elektron- illetve atomerő mikroszkópiát használtunk.
Eredmények: Az aggregometria során mért görbe alatti terület (AUC) tekintetében szignifikáns különbséget tapasztaltunk (p<0,05) a teljes vérhez képest az alsó és felső frakciókban. Egészségesekben a felső frakcióban hiperaggregabilitást, míg az alsó frakcióban aggregációgátlást tapasztaltunk ADP jelenlétében. A felső frakcióban szignifikánsan több alfa granulumot tartalmazó nagyméretű, magasabb H-IPF értéket mutató vérlemezke volt. A clopidogrelt szedő betegekben a felső frakcióban mért AUC érték 59%-ban a terápiás tartomány (AUC: 0-53) felett volt, tehát a felfelé szálló trombociták ADP jelenlétében aggregáltak. Az AUC összefüggést mutatott az emelkedett MPV, LCR értékekkel a felső frakcióban (mindkét esetben p<0,05).
A clopidogrelt szedő betegeket reszponder (n=34) és non-reszponder (n=12) alcsoportokra osztottuk a teljes vér AUC lapján. A felső frakciók összehasonlításakor a H-IPF (%) szignifikánsan magasabb volt a nonreszponderekben, mint az egészségesekben.
Következtetés: Új megközelítésünk segítségével különböző morfológiájú és funkcionálisan eltérő karakterisztikájú trombocita populációkat sikerült azonosítani, melyek eltérő aggregabilitási tulajdonságokkal rendelkeznek.
Introduction: Elevated mean platelet volume (MPV) and immature platelet fraction (IPF) are predictive for vascular risk. Both can be associated with high-ontreatment residual platelet reactivity (HTPR), however the exact mechanism of HTPR is not fully clear yet. We aimed to explore the infuencing factors of HTRP with a novel approach (modified Westergreen method), called platelet antisedimentation rate. Besides, the morphological and functional differences of platelets after one hour gravity sedimentation were analyzed here.
Methods: Blood samples from 46 post stroke patients and 21 healthy subjects were analyzed for platelet count, MPV, IPF, large cell ratio (LCR) and high-fluoresecent immature platelet fraction (H-IPF). As a novelty, not only whole blood, but upper and lower half
blood samples after 1-hour gravity sedimentation were analyzed. Platelet aggregometry (area under the curve, AUC) was used for the whole blood and separated samples to explore functional differences in patients and controls. Morphological studies were performed by transmission electronmicroscopy and atomic force microscopy.
Results: The AUC of the whole blood showed significant differences compared to the upper and lower samples separated after 1-hour sedimentation in patients and controls (p<0.05). In healthy subjects, we detected ex vivo hyperaggregability in the upper fraction, meanwhile inhibition of aggregation was found in the lower fraction in the presence of ADP. In the upper fraction more alpha granules were visualized by transmission electronmicroscopy, and higher H-IPF (%) were detected. Remarkably, AUC measured in the
upper samples in 59% of patients on clopidogrel were exceeding the therapeutic range suggesting that ascending platelets exert aggregation in the presence of ADP. This observation was associated with increased MPV and LCR in the upper samples (both p<0.05).
Based on whole blood AUC, patients on clopidogrel were dichotomized as responders (n=34) and nonresponders (n=12) and the percentage of H-IPF was significantly higher among non-responders compared to controls in the upper samples.
Conclusion: Using our new approach, we were able to identify platelet populations with different morphology and functionally different characteristics exerting different aggregability properties.